卡介苗对豚鼠实验性哮喘的预防性治疗作用

目的:观察卡介苗(BCG)对哮喘豚鼠的预防治疗作用。方法:采用31只豚鼠,分为3组进行处理,分别为对照组、卵蛋白(OVA)致敏组和BCG处理组。用OVA(Ⅲ级)致敏豚鼠复制豚鼠哮喘模型。结果:本模型采用10%的OVA致敏,1%的OVA激发,所有动物都表现有不同程度的过敏反应症状。实验动物在接受BCG注射后,表现为以下特点:一是外周血淋巴细胞和单核细胞增加;二是BALF中细胞分类的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中以淋巴细胞的增加最为明显。 经过OVA致敏的动物BALF和肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)明显增加,BCG不同程度地降低肺组织EOS的气道浸润及减轻OVA致敏豚鼠的气道反应。结论:[HTSS]使用本实验体系BCG可以减轻实验性哮喘的气道炎症反应。     

蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的 探讨蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)技术观测蝎毒重组蛋白对肿瘤细胞内钙离子浓度([Ca2+]I)的影响,探讨[Ca2+]I变化时Ca2+的可能来源.结果 蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用;荧光显微镜显示,蝎毒重组蛋白作用细胞48 h后细胞内钙离子荧光强度增强,提示[Ca2+]I升高;流式细胞仪显示蝎毒重组蛋白在不同情况下可显著增加肿瘤[Ca2+]I(P<0.05).结论 蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖具有显著抑制作用,可能与升高肿瘤[Ca2+]I继而诱导肿瘤细胞凋亡有关;其升高肿瘤[Ca2+]I是通过开放肿瘤细胞膜钙通道和肿瘤细胞内钙库释放两条途径实现.     

蝎毒及蝎毒多肽对小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用

目的观察蝎毒(SV)及蝎毒多肽(PSV)对正常小鼠免疫功能和外周血细胞计数的作用.方法取正常小鼠45只,随机分为3组:SV组、PSV组、对照组,分别腹腔注射,1次/d,连续5d.于首次给药6h、24h、8d后,每组取小鼠5只,称体重,眼球取血,计数外周血细胞、处死后脾脏、胸腺,计算脾重指数、胸腺指数.8d取外周血后测试体能.结果 SV组6h、24h、8d白细胞计数增加(p<0.05);PSV组略高于对照组.SV组6h中性粒比例明显增多,24h淋巴细胞比例明显增加(p<0.05),8d二者比例恢复正常;PSV组6h、24h中性粒略有增加,8d恢复正常.两组单核细胞均有增高.血小板计数SV组维持正常,PSV组升高.SV、PSV组脾重指数、胸腺指数和红细胞计数与对照组相比均不减少或略有增加(p>0.05),两组体能增强明显.结论 SV及PSV均可提高正常小鼠的免疫功能,维持或增加外周血各类细胞数目,改善机体整体功能状态.     

蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其机制

目的 探讨蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其抗肿瘤机制.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)技术观测蝎毒重组蛋白对肿瘤细胞内钙离子浓度([Ca2+]I)的影响,探讨[Ca2+]I变化时Ca2+的可能来源.结果 蝎毒重组蛋白对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用;荧光显微镜显示,蝎毒重组蛋白作用细胞48 h后细胞内钙离子荧光强度增强,提示[Ca2+]I升高;流式细胞仪显示蝎毒重组蛋白在不同情况下可显著增加肿瘤[Ca2+]I(P<0.05).结论 蝎毒重组蛋白对人肺腺癌A549细胞增殖具有显著抑制作用,可能与升高肿瘤[Ca2+]I继而诱导肿瘤细胞凋亡有关;其升高肿瘤[Ca2+]I是通过开放肿瘤细胞膜钙通道和肿瘤细胞内钙库释放两条途径实现.     

多种中药成分诱导大鼠骨髓间质干细胞转变为神经元样细胞

目的　体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为神经元样细胞。方法　通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养 ,流式细胞仪检测其表面抗原表达 ,中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。光镜下观察细胞形态 ,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志。结果　大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。流式细胞仪检测结果显示CD1 4、CD1 1α、CD34、CD38、CD45、CD80、CD86为阴性 ,CD2 9、CD44、CD90、CD1 0 5、CD1 66呈阳性。黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导 1～ 3h后大部分MSCs转变为神经元样细胞 ,出现胞体和突起 ,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶 (NSE)、巢蛋白 (nestin)呈阳性 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阴性。结论　多种传统中药成分及中药制剂体外能诱导大鼠MSCs分化为神经元样细胞     

肿瘤干细胞与肿瘤转移

肿瘤干细胞（TSCs）在肿瘤启动作用中的重要性已在造血系统肿瘤中得到证实，最近亦有在实体瘤中的相关报道。TSCs与正常干细胞具相似的生物学特性，这对研究TSCs与肿瘤转移的关系有非常重要意义？文章简要论述TSCs研究现状及TSCs与肿瘤转移两者可能存在的相关性。     

黄体酮诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞实验研究

目的：体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞。方法：通过贴壁法分离大鼠MSC，体外扩增培养，黄体酮定向诱导。MSC分化为类神经元样细胞。光镜下观察细胞形态，免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志。结果：大鼠骨髓间质干细胞可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。黄体酮诱导3h后大部分MSC转变为神经元样细胞，出现胞体和突起，免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性、GFAP阴性。结论：大鼠骨髓间质干细胞可在体外诱导分化为神经元样细胞。     

五段滚动式病理生理学课外实验教学模式的构建与成效

目的 培养学生的科研创新能力,构建创新型病理生理学课外实验教学模式.方法 运用创新型五段滚动式培养方法,将课外实验教学分为动员引导、择优选拔、课题申报、课题实施及课题总结5个阶段.结果 自2002年以来,约300名学生参与五段滚动式教学,获得学院学生科研课题立项36项,发表学术科研论文26篇,参与申报专利2项,学生的科技作品在各级竞赛中获奖31项,其中1项获得"挑战杯"全国大学生课外学术科技作品竞赛二等奖.此外,相关指导教师也获得广州医学院学生课外科研活动指导工作奖励20余项.结论 采用创新型五段滚动式培养方法,成功地构建了创新型病理生理学课外实验教学模式,取得了非常显著的成效.     

CEA-rV对小鼠巨噬细胞抗原呈递功能的影响

目的：探讨癌胚抗原重组痘苗病毒（CEA－rV)对巨噬细胞（MΦ）抗原呈递功能的影响。方法：采用混合淋巴细胞反应（MLR），检测接种CEA－rV小鼠MΦ的抗原呈递功能。采用流式细胞术（FCM）检测MΦMHC－I（H－2K^b)、MHC－Ⅱ（I－A^b)及B7（B7－2）分子的表达。采用荧光抗体直接染色法，检测CEA^ 肿瘤细胞H－2K^b和I－A^b分子的表达。结果：腹腔接种CEA－rV小鼠MΦ组（CEA－rV MΦ组）T细胞分泌IL－2的水平较接种-VV株及NS组显著增强（P＜0．01）。小鼠腹腔MΦ上I－A^b和B7－2分子的固有表达较低（分别为41．7％和13．7％）。接种W－VV株后，I－A^b及B7－2分子的表达改变不明显（分别为44．3％和15．1％）；而接种CEA－rV后，I－A^b及B7－2分子的表达明显增强（分别为87．2％和39．5％）。各组CEA^ 肿瘤细胞MHC－I分子呈强表达，但却无MHC－Ⅱ分子。结论：腹腔接种CEA－rV小鼠的MΦ，可使MΦ其抗原呈递功能显著增强。MΦ的MHC－Ⅱ与B7－2分子表达的增强，可能是其抗原呈递功能增强的主要原因，提示MHC－Ⅱ与B7－2分子可能与CEA－rV的抗瘤作用密切相关。     

逆转录病毒介导外源基因高效感染大鼠骨髓间充质干细胞

目的 通过逆转录病毒系统将小鼠同源盒基因Soxl转移至大鼠骨髓间充质干细胞（rMSC）。检测外源基因的表达，感染效率及感染时间。方法 常规分子生物学亚克隆技术构建重组逆转录病毒载体，转染至包装细胞株PT67，制备含目的基因的重组逆转录病毒液，感染rMSC，并用带EGFP表达盒的pLEGFP-N1载体的逆转录病毒系统作为平行对照，评估感染率；使用Westernblot以及免疫组织化学的方法检测携带目的基因的重组逆转录病毒在rMSC中的感染和表达情况。结果 本实验成功地制备了pLXSN—Soxl重组逆转录病毒载体并制备出高滴度病毒颗粒；将病毒上清感染rMSC，EGFP阳性细胞为21％，感染时间持续20d，而对照脂质体转染法EGFP阳性细胞仅为3％。免疫组化及Westernblot显示用重组逆转录病毒液感染的rMSC可表达外源基因产物Soxl蛋白。结论 采用逆转录病毒介导的方法可以将外源性基因高效转移至rMSC中，并有外源性基因的稳定表达。